석회성 대동맥 판막 질환(CAVD)은 중증 합병증을 동반하는 판막성 심장 질환으로, 만성 신장 질환(CKD) 환자에서 흔하게 발생합니다. p-크레실 황산염(PCS)은 단백질 결합성 요독성 독소로서 만성 염증을 유도합니다. 클로토와 시르투인-1(SIRT1)은 CKD 유발 혈관 석회화를 완화할 수 있는 잠재적 치료 인자로 여겨지고 있습니다. 본 연구는 PCS가 판막 간질세포(VIC)의 석회화를 촉진하며, 이 효과가 클로토/SIRT1 신호 경로에 의해 조절될 수 있다고 가정했습니다. 분리된 돼지 VIC을 대상으로 Alizarin Red S 염색, 웨스턴 블롯, 면역조직화학 분석을 실시하여, 다양한 7일간의 처리 후 석회화 및 클로토/SIRT1 신호 경로를 평가했습니다. VIC 처리군에는 PCS(10 및 100 µM), 클로토(100 pM), 저산소 유도 인자-1α(HIF-1α) 저해제 PX-478(0.5 µM), 그리고 SIRT1 활성제 SRT1720(1 mM) 처리가 포함되었습니다. 더불어, 본 연구에서는 PCS로 유도한 쥐 CKD 모델을 구축하고, 생체 내에서 클로토가 대동맥 판막에서의 RUNX2 발현에 미치는 효과를 분석하였습니다. PCS 처리는 VIC 석회화, NF-κB 아세틸화, RUNX2와 HIF-1α 발현을 증가시키는 반면, 클로토 발현은 감소시켰습니다. 클로토 보충은 PCS에 의해 유도된 VIC 석회화 증가를 완화시키고, PCS 매개 NF-κB 아세틸화 및 RUNX2 발현 증가도 억제하였습니다. 추가로, SIRT1 활성제 SRT1720은 PCS에 의한 VIC 석회화 증가를 완화하고, PCS 처리 VIC에서 클로토는 상향 조절하고 RUNX2는 하향 조절하였습니다. 또한 본 연구는 클로토 보충이 PCS 처리 CKD 모델 쥐의 대동맥 판막에서 CKD에 의해 유도된 RUNX2 상향 조절을 완화함을 확인했습니다. 본 연구는 PCS가 HIF-1α 신호를 활성화하고 클로토를 하향 조절함으로써 VIC 석회화를 유도함을 밝혔다. 클로토 또는 SRT1720 처리는 PCS에 의한 NF-κB/RUNX2 신호 경로의 활성화를 감소시켜, 이들 인자가 PCS 유도 CAVD의 표적 치료에 있어 중요한 잠재력을 지님을 시사했습니다.