아프리카돼지열병(ASF)은 아프리카돼지열병 바이러스(ASFV)에 의해 유발되며, 치사율이 거의 100%에 달하는 매우 전염성과 치명적인 질병입니다. 현재까지 ASFV의 여러 유전자 기능은 완전히 규명되지 않았습니다. 본 연구에서는 pD345L이 후기 발현 바이러스 단백질로 바이러스 팩토리에 국재화되어 있음을 확인하였습니다. Ⅰ/Ⅱ형 JX23-02 균주로부터 재조합 균주 JX23-02ΔD345L을 제작하였으며, in vitro 실험 결과 D345L 유전자 결실이 바이러스 증식을 현저하게 저해함을 밝혔습니다. 추가 분석을 통해 JX23-02ΔD345L이 돼지 폐 포식세포(PAMs)에서 염증성 사이토카인(IL-1β, TNF-α)과 인터페론 경로 구성요소의 발현을 뚜렷이 증가시키고, 파이로프시스, 세포자멸사, 인터페론 반응을 유도함을 확인하였습니다. In vivo 동물실험에서 JX23-02ΔD345L 균주는 고용량 접종에도 ASF의 전형적인 임상 증상을 전혀 유발하지 않아, 완전히 약독화됨을 입증하였습니다. 또한, 한 번의 접종만으로도 ASFV에 대한 특이적인 체액성 및 세포성 면역 반응이 유도되었고, 동종주 JX23-02 근육내 도전 시 80%, 이종주 SY18 도전 시 60%의 보호 효과를 보였습니다. 본 연구는 D345L이 ASFV 병원성에 핵심적인 독력 관련 유전자이며, 바이러스 복제 및 숙주 항바이러스 반응과 밀접하게 연관되어 있음을 시사합니다. 나아가 JX23-02ΔD345L은 효과적이고 안전한 ASFV 백신 개발을 위한 후보 물질임을 보여줍니다. 이 결과는 ASFV 연구와 백신 개발에 중요한 타겟 및 근거를 제공합니다.