돼지에서 정자의 동결 내성은 유전적, 사양 관리 및 사육 방법의 차이에 따라 상당한 변동을 보입니다. 멧돼지 정자 동결 보존은 동결 내성의 불완전한 일관성으로 인해 아직 충분히 활용되지 않고 있습니다. 동결 내성이 우수한(GF) 정액은 암퇘지의 산자 수를 증가시키고 교배 비용을 절감시킵니다. 이전 연구에서는 소, 양, 돼지에서 동결 내성의 바이오마커가 확인되었습니다. 이러한 바이오마커를 종합적으로 조사하기 위해, 본 연구에서는 완난흑돼지에서 동결 내성이 낮은(PF) 정자와 동결 내성이 우수한 정자의 단백질체 프로파일링을 수행했습니다. 2,485개의 단백질이 검출되었으며, 이 중 337개의 유의하게 발현이 차별화된 단백질(DEPs)이 확인되었습니다. Gene Ontology 주석 결과, DEPs는 단백질 항상성 유지, 투명대 결합, 다정자수정 방지, ATPase 활성 조절 등 중요한 생물학적 과정에 관여함을 보여주었습니다. 분자 수준에서는 면역 신호 및 산화 스트레스 방어 기능이 포함되어 있었습니다. KEGG 경로 분석에서는 DEPs가 정자 접착 복합체, 핵산 헬리카제 계열, 미토콘드리아 막 단백질 클러스터 등에서 풍부하게 나타났습니다. 세포 내 소분획 분석에서는 DEPs가 주로 세포질, 세포외 기질, 핵, 미토콘드리아, 원형질막에 분포하는 것이 관찰되었습니다. 차별적으로 발현된 단백질(HSP90AA1, ACE, ANXA2, DEFB1, S100A8)의 웨스턴 블롯 검증 결과는 단백질체 서열 분석 데이터와 일치함을 확인했습니다. 본 연구는 멧돼지 정자의 동결 내성을 결정하는 주요 단백질체 차이를 제시하며, 동결 보존 프로토콜 개선 및 돼지 번식 효율성 증대에 대한 통찰을 제공합니다.