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장간막 생리학과 장벽 기능 연구를 위한 2D 돼지 대장 오가노이드 모델의 개발 및 특성화

2025-05-08 19:00 | 추천 : 0 | 댓글 : 0
돼지 대장 상피는 영양소 흡수, 이온 운반 및 장벽 기능에 중요한 역할을 합니다. 그러나 윤리적 문제로 인해 이를 연구하기 위해 동물 모델의 대안이 필요합니다. 본 연구의 목적은 실제 대장 조직을 밀접하게 모방하여 위장관 생리학, 병리학 및 약리학 연구를 지원하는 2차원(2D) 돼지 대장 오가노이드의 인 비트로 모델을 개발하고 특성화하는 것이었습니다. 돼지 대장 크립트는 3차원(3D) 오가노이드 시스템에서 분리 및 배양되었으며, 이후 트랜스웰 인서트 위에서 2D 단층으로 분리되었습니다. 단층의 무결성은 상피간 전기 저항(TEER) 측정 및 전자 현미경을 통해 평가되었습니다. 모델의 기능적 필요 조건은 주요 이온 채널과 운반체의 mRNA 발현 측정을 통해 평가되었으며, 정량적 RT-PCR을 사용했습니다. Ussing 챔버 실험은 생리학적 활성을 검증하기 위해 수행되었습니다. 2D 단층은 견고한 TEER 값을 보여주었으며, 미세 섬모와 점액 분비 배세포를 포함한 구조적 특성을 실제 대장 조직에서 관찰된 것과 비교하여 유지했습니다. 유전자 발현 분석 결과, 중요한 운반체에 대한 2D 오가노이드 모델과 실제 조직 간에 유의미한 차이가 없음을 나타냈습니다. Ussing 챔버 실험은 실제 대장 조직에서 관찰되는 생리학적 반응과 일관된 결과를 보여주었습니다. 결론적으로, 2D 돼지 대장 오가노이드 모델은 실제 대장 상피의 생리적 및 기능적 속성을 정확하게 표현할 수 있으며, 장벽 속성, 이온 운반 및 위장관 질환의 병태생리학을 조사하는 데 가치있는 도구를 제공합니다. 본 모델은 3R 원칙을 준수합니다.