HEV, 즉 A형 간염 바이러스는 인간과 동물 모두에게 전 세계적인 위협을 가하는 중요한 인수공통 감염성 병원체입니다. HEV의 광범위한 감지를 위한 전략을 발전시키기 위해, 우리는 HEV ORF2 단백질의 보존된 영역을 표적으로 하는 고친화성 단일클론 항체를 개발하고, 이러한 항체를 기반으로 차단 ELISA를 확립했습니다. 항원 코팅 농도, 항체 희석 등 여러 조건은 체커보드 적정법을 사용하여 최적화되었습니다. 잘 특성화된 혈청 샘플을 사용하여, 각 종에 대한 컷오프 값을 ROC 곡선 분석을 통해 설정했습니다: 돼지 혈청의 경우 26.0 %로, 감도 및 특이도는 96.0 %에 달했으며, Apodemus peninsulae 혈청의 경우는 35.5 %로 감도 및 특이도가 각각 88.0 %와 98.0 %였습니다. 이 시험은 PCV2, PRRSV와 교차 반응이 없고, 상업적 간접 ELISA 키트보다 두 배 높은 최대 검출 희석을 보여, 뛰어난 민감성을 나타냅니다. 212개의 돼지 혈청 샘플을 사용한 임상 검증에서는 상업적인 ELISA 키트와 97.64 %의 일치율을 보였습니다. 또한, 이 시험은 Apodemus peninsulae의 항 HEV 항체의 동적 변화를 효과적으로 모니터링하였으며, 상업적 키트의 결과와 밀접하게 일치했습니다. 이 ORF2 에피토프 기반 차단 ELISA는 교차 유전자형 및 교차 종 감지를 가능하게 하여, 바이러스 다양성으로 인한 위음성을 최소화하고 진단, 식품 안전, 인수공통 감염 감시 및 백신 개발에 있어 상당한 유용성을 제공합니다.