Torque Teno 바이러스(TTVs)는 인간과 동물에서 호흡기 감염, 간염, 신경 질환 및 자가면역 질환과 높은 역학적 연관성을 가진 유비쿼터스 소형 DNA 바이러스입니다. 돼지 TTVs(TTSuVs)는 동시 감염 인자에 의해 임상 징후를 악화시킬 수 있는 기회감염성 병원체로 간주됩니다. TTV가 질병에 어떻게 기여하는지 더 이해하는 것이 중요하지만, TTV의 생체 내 감염 패턴을 연구하기 위한 동물 모델과 도구가 현저히 부족합니다. 다중 프로브 증폭을 사용한 RNA 현장 혼성화(RNA-ISH)는 높은 수준의 특이성과 민감도를 가지고 있으며 에이전트 특이적 RNA 또는 mRNA를 검출할 수 있는 능력 때문에 최근 인기를 얻고 있습니다. 현재 TTSuV1 병원성을 이해하는 데 사용할 수 있는 면역조직화학 분석을 통해 바이러스 항원을 검출할 수 있는 상용 TTSuV1 항체는 없습니다. 따라서 이 연구의 목표는 TTSuV1에 대한 RNA-ISH 분석법을 개발하는 것이었습니다. 양성 대조군을 생성하기 위해, TTSuV1로 감염되거나 TTSuV1 게놈으로 형질도입된 PK-15 세포를 챔버 슬라이드에서 배양하였습니다. TTSuV1 ORF1-특이적 RNA 프로브 혼합물을 세포에 하이브리드화하여 특정 결합을 크로모제닉 반응을 통해 성공적으로 시각화했습니다. TTSuV1에 감염된 쥐의 간, 신장, 심장, 비장 및 장기를 감염 후 15일과 30일에 수집했습니다. 최종적으로, TTSuV1 mRNA 검출을 위한 RNA-ISH가 조직에서 최적화되었습니다. 감염된 쥐의 간세포와 신장세뇨관 상피에서 15일과 30일 감염 후 감지율 33%로 TTSuV1-특이적 신호가 검출되었습니다. 요약하자면, 이 RNA-ISH 분석법은 조직 내 TTSuV1 바이러스 복제를 시각화하는 유용한 도구이며, 향후 임상 샘플에 응용 가능성이 있습니다.