프로그램된 세포사멸 1 (PD-1)과 그 리간드인 프로그램된 세포사멸 리간드 1 (PD-L1)은 중요한 면역 조절 점검으로 기능합니다. 여러 연구들은 다양한 돼지 질병의 악성 진행과 PD-1 및 PD-L1의 변칙적인 발현 사이의 연관성을 보여주었으며, 이에 따라 높은 친화도의 돼지 PD-1 및 PD-L1 단클론 항체(mAbs)의 개발과 탐색은 연구와 치료 개입을 발전시키는 데 상당한 중요성을 가집니다. 본 연구에서는 서부블롯(WB), 간접 면역형광분석(IFA) 및 유세포분석법(FCM)에서 강력한 반응성을 나타내는 돼지 PD-1 및 PD-L1 mAbs를 생성했습니다. 신규 식별된 B세포 에피토프 90GRDPRFHVTPL100과 185REEKLFNVTST195의 PD-1 및 PD-L1 mAbs는 WB와 구조 분석에서 보인 바와 같이 선형 및 표면 노출로 나타났습니다. 비교 서열 분석은 PD-L1 에피토프가 종에 걸쳐 매우 보존되어 있는 반면, PD-1 에피토프는 낮은 종간 보존성을 보여주었습니다. 또한, 두 PD-1 mAbs와 여섯 PD-L1 mAbs의 차단 효능은 분자 도킹을 통해 낮은 것으로 예측되었습니다. 차단 효능을 더욱 평가하기 위해, 선천적이고 진핵 시스템을 통해 발현된돼지 PD-L1-토끼 Fc 융합 단백질을 사용하여 유세포 분석 기반의 시험을 개발했습니다. 예측과 일치하게, 우리의 실험실 데이터는 PD-1 mAbs 및 PD-L1 mAbs가 IgG 그룹에 비해 4% 이하의 차단률을 보였음을 입증했습니다. 요약하면, 우리는 보고되지 않은 B세포 에피토프를 인식하는 돼지 PD-1 및 PD-L1 mAbs를 생성하였으며, 차단되지 않는 mAb와 에피토프를 식별하는 신뢰할 수 있는 방법을 확립하였고, 이는 새로운 진단 방식과 치료제 개발을 촉진할 수 있습니다.