아프리카돼지열병(ASF)은 ASF 바이러스(ASFV)에 의해 유발되는 고위험의 국경 간 가축 질병으로, 전 세계 양돈 산업에 막대한 영향을 미치고 있습니다. 백신은 아직 개발 중이거나 현장 평가 단계에 있기 때문에, ASFV의 조기 진단은 효과적인 질병 관리와 확산 저지에 매우 중요합니다. 급성 또는 아급성 ASFV 감염에 대한 바이러스 검출에는 주로 PCR이 사용되지만, 항체 검출은 저병원성 ASFV 감염 동물, 회복 개체 확인, 바이러스 전파 추적 등에서 중요한 역할을 합니다. 현재 ASFV 항체 검출을 위한 ELISA가 1차 혈청학적 선별에 널리 사용되고 있습니다. 그러나 위양성 결과를 피하기 위해 세계동물보건기구(WOAH)에서는 간접 면역형광검사(IFA), 간접 면역과산화효소검사(IPT), 면역블롯검사 등 2차 혈청학적 검사를 통해 ELISA 양성 사례를 재확인할 것을 권장하고 있습니다. 이러한 전략은 특이도는 개선되지만, 민감도 즉 위음성 사례를 완전히 해소하지는 못합니다. 본 연구에서는 이 문제를 해결하기 위해 새로운 인-셀(in-cell) ELISA(icELISA)를 개발하였습니다. icELISA에 대한 수신자 조작 특성(ROC) 분석 결과, 샘플 대 양성 대조군 비율(S/P 비율) 47%가 최적의 컷오프 값으로 도출되었으며, 분석적 민감도 99.46%, 분석적 특이도 99.43%를 보였습니다. 진단 민감도 비교 분석 결과, icELISA는 150개의 샘플에서 양성 반응을 확인하여 블로킹 ELISA-IPT 조합(132개 샘플)보다 18개 더 많은 양성 샘플을 검출하였습니다. 추가 분석에서, 이 18개 샘플은 IgG가 아닌 ASFV 특이적 IgM 항체를 함유한 것으로 확인되었습니다. 이러한 결과는 icELISA가 ASFV 특이적 IgG와 IgM을 모두 검출할 수 있음을 보여주며, 특히 검사 샘플에서 IgM 항체만이 존재하는 초기 감염 단계에서 블로킹 ELISA-IPT 조합보다 더 빠른 조기 진단이 가능함을 시사합니다.