아프리카돼지열병(ASF)은 돼지에서 치명률이 매우 높은 질병으로 '가장 치명적인 질병'으로도 불리며, 임상 증상상으로 고전적돼지열병(CSF)과 구별이 어려운 열, 설사, 구토 등의 증상을 보여 현장 진단 시 감별이 복잡합니다. ASF와 CSF는 세계동물보건기구(WOAH) 지정 중요 질병으로, 신속하고 정확한 구별이 효과적인 방역 및 확산 방지에 필수적입니다. 본 연구에서는 아프리카돼지열병 바이러스(ASFV)와 고전적돼지열병 바이러스(CSFV) 항체를 동시에 검출할 수 있도록 라텍스 미소구(LMs)를 이용한 다색 측방면역분석법(LFIA)을 개발하였습니다. 이 분석법은 15분 이내에 육안상 판독이 가능하며, ASFV 항체는 적색, CSFV 항체는 청색으로 구분됩니다. 분석법 최적화 결과, ASFV 항체 검출 시 1:256의 민감도를 보였으며(상용 ASFV ELISA 키트와 동등), CSFV 항체에 대해서는 1:64로 4배 더 높은 민감도를 나타냈습니다. 또한 동물의 일반적 감염 질병 바이러스 및 소바이러스성설사바이러스(BVDV)와의 교차반응 없이 높은 특이성을 확인하였습니다. 임상 혈청 샘플 180건을 상용 ELISA 키트와 비교한 결과, ASFV에 대해 Cohens kappa 값이 0.986, CSFV에 대해 0.918로 탁월한 일치도를 보였습니다. 또한, 분석법의 로트 간 및 로트 내 평가에서 반복 재현성이 확인되었습니다. 전체적으로, 다색 라텍스 미소구 기반 LFIA는 ASFV 및 CSFV 항체의 현장 신속 진단(POCT)에 있어 빠르고 민감하며 특이적이고, 비용 효율적인 도구로, 현장 정기 모니터링 및 질병 통제에 활용 가치가 높음을 제시합니다.