돼지써코바이러스 유형 2 (PCV2)와 유형 3 (PCV3)은 전 세계적으로 돼지 건강에 심각한 위협을 가하고 있습니다. PCV2 필드 균주는 다양한 유전자형의 공동 순환과 함께 지속적으로 변이하여 기존 백신으로부터의 잠재적인 면역 회피를 초래합니다. 급증하는 병원체인 PCV3는 현재 상업적으로 이용 가능한 백신이 없습니다. 임상적으로 PCV2-PCV3의 공동 감염이 흔히 발생하여 이중가치 백신의 긴급한 필요성을 강조합니다. 본 연구는 mi3 나노케이지를 기반으로 한 폭넓은 범위와 높은 효율성을 갖는 이중가치 나노입자 항원 (PCV2-PCV3 Nano)을 구축하고 그 면역학적 효능을 평가하는 것을 목표로 하였습니다. 첫째, 현재 유행하는 균주들을 분석하여 PCV2 및 PCV3 캡시드 (Cap) 단백질의 아미노산 서열을 최적화하였습니다. SpyCatcher (SC) 또는 SpyTag (ST) 도메인은 각각 mi3, PCV2 Cap 또는 PCV3 Cap에 유전적으로 융합되었습니다. 융합 서열은 코돈 최적화되어 대장균에서 이종 발현되었습니다. 정제 후, PCV2 Cap 및 PCV3 Cap이 SC-ST 생화학 결합을 통해 mi3 나노케이지에 코발렌트하게 고정되어 성공적으로 PCV2-PCV3 Nano를 구축하였습니다. BALB/c 마우스의 면역화를 통해 PCV2-PCV3 Nano가 기존 항원 및 상업적 PCV2 백신과 비교하여 PCV2b, PCV2d 및 PCV3 감염에 대한 면역 보호와 더 높은 항체 수치를 유도함을 보여주었습니다. 본 연구는 PCV2-PCV3 Nano의 산업적 응용을 위한 중요한 기초를 확립하였으며, mi3 기반의 다가 백신 개발을 위한 기술적 지원을 제공합니다.