간염 E 바이러스(HEV)는 인수공통 전염병 병원체로 인류와 동물 건강에 전 세계적으로 중요한 위협을 가하고 있습니다. HEV의 광범위한 검출 전략을 발전시키기 위해, 우리는 HEV ORF2 단백질의 보존 영역을 표적으로 하는 고친화력 단일 클론 항체를 개발하고, 이 항체에 기반한 차단 ELISA를 확립했습니다. 항원 코팅 농도, 항체 희석 등 조건은 체커보드 희석법을 사용하여 최적화되었습니다. 잘 특성화된 혈청 샘플을 사용하여 서로 다른 종의 절단값을 ROC 곡선 분석을 통해 설정하였으며, 돼지 혈청의 경우 26.0%로 96.0%의 민감도와 특이성을, Apodemus peninsulae 혈청의 경우 35.5%로 민감도 88.0%, 특이성 98.0%를 달성했습니다. 이 검사법은 PCV2, PRRSV와의 교차 반응을 나타내지 않았고, 상업적 간접 ELISA 키트의 두 배의 최대 검출 희석 배수를 보이며 우수한 민감성을 나타냈습니다. 212개의 돼지 혈청 샘플로 임상 검증한 결과, 상업적 ELISA 키트와 97.64%의 일치율을 보였습니다. 또한, 이 검사법은 Apodemus peninsulae의 항-HEV 항체의 동적 변화를 효과적으로 모니터링하며, 그 결과는 상업 키트와 거의 일치했습니다. 이 ORF2 에피토프 기반 차단 ELISA는 유전자형 및 종간 검출을 가능하게 하여, 바이러스 다양성으로 인해 발생할 수 있는 위양성을 최소화하고 진단, 식품 안전, 인수공통 감시 및 백신 개발에 상당한 유용성을 제공합니다.