아프리카돼지열병바이러스(ASFV)는 국내외 돼지에게 높은 치사율을 보이는 바이러스성 출혈 질환으로, 전 세계 식량 안보와 가축 경제에 중대한 위협을 가하고 있습니다. ASFV의 신속하고 정확한 검출은 발병 억제를 위한 효과적인 조치에 필수적입니다. 본 연구는 p72 유전자를 표적으로 하는 여덟 개의 올리고뉴클레오타이드 프로브를 사용하여 ASFV를 검출하기 위한 금 나노입자 기반 바이오센서를 평가하였습니다. 연구의 목적은 높은 민감성과 특이성을 지니고, 넓은 유전형 범위를 커버할 수 있는 최적의 프로브를 식별하는 것이었습니다. 이를 위해 Clustal Omega를 사용하여 각 프로브와 다양한 ASFV 유전체 간 다중 서열 정렬을 수행하였고, 유전형에 따른 결합 강도를 평가하기 위해 유사성 행렬을 생성하고 열지도로 시각화했습니다. 이후 이 바이오센서는 합성 ASFV DNA와 5분 반응시간 동안 테스트되었으며, 분광 광도 분석을 통해 검출 성능을 평가하였습니다. 민감도는 표적 DNA의 연속 희석을 통해 측정되었고, 비표적 세균 DNA를 사용하여 특이성이 확증되었습니다. 프로브 2 (40 bp, 50.0% GC 함량)와 프로브 5 (60 bp, 54.2% GC 함량)는 여러 ASFV 유전형에 걸쳐 강한 결합력을 보였으며, 550 복사본을 검출하는 데 성공하며 교차 반응성을 나타내지 않았습니다. Spearman의 순위 상관 관계를 사용한 통계 분석 결과, GC 함량이 민감성과 유의미한 상관 관계가 있는 것으로 나타났습니다 (ρ = -0.80, p = 0.016), 반면 프로브 길이, 2차 구조 안정성 및 결합 이점은 유의미한 관계를 보이지 않았습니다. 본 연구는 프로브 설계를 향상시키기 위해 유전체 정렬 도구와 실험적 바이오센서 검증을 통합하는 것이 중요하다는 점을 강조하였습니다.