Torque Teno 바이러스(TTV)는 인간과 동물에서 호흡기 감염, 간염, 신경 질환 및 자가면역 질환과 긴밀하게 관련된 작은 DNA 바이러스로, 전 세계적으로 널리 퍼져 있습니다. 돼지 TTV(TTSuV)는 기회병원성 병원체로 간주될 수 있으며, 동반 감염 인자에 의해 임상 증상을 악화시킵니다. TTV가 질병에 어떻게 기여하는지에 대한 추가적인 이해가 필수적이나, in vivo 감염 패턴을 연구할 동물 모델과 도구가 현저히 부족합니다. 다중 프로브 증폭을 사용하는 RNA 원위치 합성(RNA-ISH)은 높은 특이도와 감도로 인해 인기를 끌고 있으며, 특정 RNA나 mRNA를 검출할 수 있습니다. 현재 TTSuV1 병원성을 이해하기 위해 사용할 수 있는 면역 조직 화학 시험을 통해 바이러스 항원을 검출할 수 있는 상업적 TTSuV1 항체가 없습니다. 따라서, 본 연구의 목표는 TTSuV1을 위한 RNA-ISH 검사를 개발하는 것이었습니다. 양성 대조군을 생성하기 위해, 챔버 슬라이드에서 자란 PK-15 세포를 TTSuV1로 감염시키거나 TTSuV1 게놈으로 형질전환했습니다. TTSuV1 ORF1 특이적 RNA 프로브 칵테일을 세포에 혼성화하여 특이적 결합이 발색 반응을 통해 성공적으로 시각화되었습니다. TTSuV1에 감염된 쥐로부터 15일 및 30일 후 간, 신장, 심장, 비장 및 장이 수집되었습니다. 마지막으로, TTSuV1 mRNA 검출을 위한 RNA-ISH가 조직에서 최적화되었습니다. TTSuV1 특이적 신호는 감염된 쥐의 간세포와 신장 세뇨관 상피에서 15일 및 30일 후 33% 검출 속도로 탐지되었습니다. 요약하면, 설명된 RNA ISH 검사는 조직에서 TTSuV1 바이러스 복제를 시각화하는 데 유용하며, 향후 임상 검체에 응용할 가능성이 있습니다.