프로그래밍된 세포사멸 1 (PD-1)과 그 리간드인 프로그래밍된 세포사멸 리간드 1 (PD-L1)은 중요한 면역 체크포인트 역할을 합니다. 여러 연구에 따르면 다양한 돼지 질병의 악성 진행과 PD-1 및 PD-L1 발현의 이상 사이에는 연관성이 있으며, 이러한 문제를 해결하려면 높은 친화성을 가진 돼지 PD-1 및 PD-L1 단일 클론 항체(mAbs)의 개발과 스크리닝이 상당히 중요합니다. 본 연구에서는 게 재활두법, 간접면역형광검정(IFA), 유세포분석법(FCM)에서 강력한 반응성을 보이는 돼지 PD-1 및 PD-L1 mAbs를 생산했습니다. 새롭게 발견된 B-세포 에피톱 90GRDPRFHVTPL100 및 185REEKLFNVTST195의 PD-1 및 PD-L1 mAbs는 체외실험과 구조 분석을 통해 선형이며 표면 노출된 것으로 밝혀졌습니다. 비교적 서열 분석을 통해 PD-L1 에피톱은 종 간에 높은 보존성을 보였으나, PD-1 에피톱은 낮은 보존성을 보였습니다. 또한, 분자 도킹을 통해 두 종류의 PD-1 mAbs와 여섯 종류의 PD-L1 mAbs의 차단 효능이 낮을 것으로 예상되었습니다. 차단 효능을 추가로 평가하기 위해, 펠렛을 발현 시스템을 통해 발현된 돼지 PD-L1-토끼 Fc 융합 단백질을 이용하여 유세포분석 기반 평가법을 생성했습니다. 예측과 일치하게, 인체 외 실험 데이터는 PD-1 mAbs 및 PD-L1 mAbs에 대해 IgG 그룹에 비해 4% 이하의 차단율을 보여주었습니다. 요약하자면, 우리는 보고되지 않은 B-세포 에피톱을 인식하는 돼지 PD-1 및 PD-L1 mAbs를 생성하였으며, 비차단 mAb과 에피톱을 식별하는 신뢰할 수 있는 방법을 확립했습니다. 이는 새로운 진단 접근법과 치료제 개발을 촉진할 수 있을 것입니다.