브루셀라증은 주요 전 세계 경제적 및 공중 보건 문제를 일으키는 보고 시점의 인수공통감염병으로, 주로 소형 반추동물, 소, 돼지에서 각각 브루셀라 멜리텐시스, 브루셀라 아보르투스, 브루셀라 수이스에 의해 발생합니다. 기존의 혈청학적 검사와 세균 배양에 더해, 특히 정량적 PCR(qPCR)의 부상은 빠른 처리 시간, 높은 민감도와 특이성으로 주목받고 있습니다. 그러나 기존 검사를 충분히 크고 다양한 데이터 세트로 검증하는 것은 여전히 도전과제이며, B. 아보르투스, B. 멜리텐시스, B. 수이스를 동시에 식별할 수 있는 신뢰할 수 있는 멀티플렉스 검사의 필요성이 절실합니다. 본 연구는 대규모 전체 유전체 시퀀싱(WGS) 데이터의 비교 분석을 통해 설계된 세 가지 브루셀라 종을 감지하기 위한 매우 민감하고 특이적인 멀티플렉스 qPCR 검사와 새로운 속 수준의 브루셀라 qPCR 검사의 개발 및 평가를 보고합니다. 이러한 프라이머-프로브 세트의 인 실리코 검증은 대규모 WGS 데이터 세트를 사용하여 99.8%에서 100%까지의 민감도와 특이성을 보여주며, 현재 발표된 qPCR 검사와 비교할 만한 또는 더 나은 인 실리코 성능을 나타냅니다. 이후, qPCR 검사는 235개의 고전적인 브루셀라 균주와 192개의 비고전적 브루셀라 또는 비브루셀라 샘플로 구성된 종합적인 유전체 DNA 패널을 사용하여 평가되었고, 100%의 민감도와 특이도, 탁월한 저수준 감지 능력을 달성했습니다. 또한 이러한 검사들은 조직 샘플에서도 브루셀라 DNA를 성공적으로 검출하였으며, 고도화된 세균 DNA 강화 과정을 통해 뛰어난 민감도와 진단 정확성을 입증하였습니다. 이 qPCR 검사는 임상 샘플 및 세균 배양에서 브루셀라 종의 빠르고 정확한 진단을 위한 귀중한 도구입니다. 브루셀라증은 동물과 인간에 영향을 미치며 전 세계적으로 주요한 건강 및 경제적 문제를 일으키는 질병입니다. 주로 브루셀라 아보르투스, 브루셀라 멜리텐시스, 브루셀라 수이스에 의해 발생합니다. 이러한 박테리아의 빠르고 정확한 식별은 감염 확산을 제어하고 공중 보건을 보호하는 데 필수적입니다. 현재의 실험실 검사는 앞서 언급한 브루셀라 종을 동시에 감지하는 능력이 제한적이며, 종종 크고 다양한 샘플 세트에 대한 검증이 부족하여 개선된 진단 도구의 필요성을 시사합니다. 본 연구는 브루셀라 속을 감지하거나 이 세 가지 중요한 종을 동시에 정확하게 식별할 수 있는 두 가지 빠르고 정확한 분자 검사의 개발 및 평가를 제시하여 시간과 자원을 절약합니다. 큰 데이터 세트 전체에서 computer-based 및 실험실 환경 모두에서 뛰어난 성능을 보유한 이 검사는 임상 및 수의학적 응용에서 개선된 진단에 대한 희망을 제공하여 공중 보건 및 동물 질병 관리 노력을 지원합니다.