돼지 생식기 및 호흡기 증후군 바이러스(PRRSV)의 면역 억제 성격은 효과적인 통제에 있어 중앙적인 장애물로 남아 있습니다. 기존의 마이크로RNA(miRNA) 기반 항바이러스 접근법은 그 효능이 제한적이고 바이러스 탈출의 위험이 높습니다. 여기서 우리는 RIG-I에 의해 유도된 선천면역 활성화와 서열 특정 유전자 사일런싱을 단일 분자 내에 통합하는 5'-트리포스페이트(5'-PPP) 말단을 가진 공학적 miRNA를 합리적으로 설계했습니다. 시험관 내에서 전사된 5'-PPP miRNA는 패턴 인식 수용체 RIG-I에 의해 효율적으로 인식되어 PRRSV에 의해 유도된 면역 억제를 억제하는 강력한 1형 인터페론 반응을 촉발합니다. MARC-145 세포에서, 5'-PPP BZL-sRNA-20이라는 구조는 면역 활성화와 유전자 사일런싱의 시너지 작용을 통해 PRRSV 복제를 강력하게 억제했습니다. 그러나 PRRSV의 자연 숙주 세포인 돼지 폐포 대식세포(PAMs)에서는 항바이러스 효과가 주로 5'-PPP에 의해 유도된 인터페론 반응에 의존하며, 타겟 서열은 제한적이거나 맥락에 따라 달라지는 이점을 제공했습니다. 이중 루시퍼라제 실험은 유전자 사일런싱 활동이 BZL-sRNA-20의 안정성을 향상시키는 5'-PPP 수정에 의존한다는 것을 확인했습니다. 이 이중 작용 전략은 RIG-I 리간드로서 광범위한 항바이러스 반응을 유발하면서 PRRSV 게놈의 보존된 영역에 직접적인 염기쌍 결합을 통해 바이러스 RNA를 특이적으로 절단하는 '면역 활성화 플러스 타겟팅' 패러다임을 확립합니다. 이러한 발견은 공학적 5'-PPP miRNA가 면역조절 항바이러스 인자로서의 잠재력을 드러내면서 RNAi 타겟팅의 기여도가 세포 맥락에 따라 다르다는 점을 강조합니다.