아프리카돼지열병 바이러스(ASFV)는 특히 아프리카를 넘어 확산한 I형 및 II형 변종이 전 세계 돼지 생산과 식량 안보를 계속 위협하고 있습니다. 현재 아프리카돼지열병(ASF) 통제 전략은 분자 진단을 기반으로 한 생물보안 조치에 크게 의존하고 있습니다. 유전자형 판별의 필요성을 해결하기 위해, 이번 연구에서는 I형 및 II형 ASFV뿐만 아니라 이들의 혼합 감염을 구별할 수 있는 사중 프라이머 증폭 저항성 변이 시스템 PCR(ARMS-PCR) 분석법을 개발했습니다. 이 분석법은 네 가지 프라이머의 다중화(multiplex)를 사용합니다: 두 개의 외부 유니버설 프라이머와 I형 및 II형 ASFV에 특정한 B646L 유전자의 보존된 단일 뉴클레오타이드 다형성(SNP, G1656A)을 타겟으로 하는 두 개의 대립 유전자 특이적 내부 프라이머가 그것입니다. 사중 프라이머 ARMS-PCR 분석법은 반응당 100 복사의 검출 한계를 보여주었는데 이는 WOAH가 권장하는 PCR 방법과 유사하며 다른 여덟 가지 돼지 바이러스와의 교차 반응성은 관찰되지 않았습니다. 게다가 임상 검증을 통해 이 분석법은 WOAH가 권장하는 표준 PCR 방법과 97.22%(35/36)의 일치율을 보여주었습니다. 요약하자면, 사중 프라이머 ARMS-PCR 분석법은 I형 및 II형 ASFV가 공존하는 지역 및 자원이 제한된 지역에 적합한 실용적이고, 특정하며, 비용 효율적인 ASF 역학적 감시 도구를 제공합니다.