배경: 돼지 유행성 설사 바이러스(PEDV)는 여전히 세계 양돈업계에 중대한 위협이 되고 있으며, 안전하고 효과적인 차세대 백신에 대한 긴급한 필요성을 강조하고 있습니다. mRNA 백신은 신속한 개발과 우수한 안전성 프로파일로 인해 유망한 플랫폼으로 부상했습니다. 목표: 본 연구는 면역정보학 전략과 실험적 검증을 결합하여 PEDV 다중에피토프 mRNA 백신을 설계하고 초기 평가를 수행하는 것을 목표로 하였습니다. 방법: 면역정보학 도구를 사용하여 PEDV 스파이크(S), 막(M), 뉴클레오캡시드(N) 단백질에서 B세포 및 세포독성 T 림프구(CTL) 에피토프를 식별했습니다. 선택된 에피토프는 다중에피토프 항원(E)으로 조립되었습니다. mRNA 구성체는 시험관 내 전사를 통해 합성되었고 지질 나노입자(LNP)에 캡슐화되었습니다. HEK293T 세포에서 발현을 평가하였고, 항원 특이적 항체 반응 및 면역 후 사이토카인 수준을 측정하여 쥐에서의 면역원성을 평가하였습니다. 결과: mRNA 구성체는 높은 구조적 완전성과 효율적인 세포내 번역을 보였습니다. LNP 제형은 우수한 물리화학적 안정성과 전달 효율성을 나타냈습니다. 항원 E mRNA-LNP 제형으로 면역화한 경우, 대조군에 비해 PEDV 특이적 IgG 수준이 유의미하게 높았습니다. 강화된 사이토카인 수준은 또한 체액성 및 세포성 면역반응의 활성화를 나타냈습니다. 결론: 본 연구는 PEDV 다중에피토프 mRNA 백신 개발을 위한 실행 가능한 워크플로를 제시합니다. 항원 E 구성은 쥐 모델에서 우수한 면역원성을 보였으며, 추가 연구와 최적화를 위한 유망한 구성이 될 가능성을 뒷받침합니다. 단백질 수준에서의 항원 발현 확인 및 면역 기작의 추가 특성을 파악하기 위한 추가 연구가 필요하지만, 본 연구 결과는 PEDV 예방을 위한 다중에피토프 mRNA 백신의 실현 가능성을 뒷받침하는 초기 증거를 제공합니다.