탈세포화된 세포외 기질(dECM)은 조직 공학 및 재생 의학(TERM)에서 특히 하이드로젤 개발에 유망한 재료로 부상하고 있습니다. dECM은 콜라겐 타입 I(Coll-I)에 비해 뛰어난 생화학적 복잡성을 제공하지만, 이는 dECM 내의 가장 풍부한 단백질로서 TERM에서 널리 사용되고 있습니다. 그러나 추출 과정, 특히 펩신 소화가 종종 단백질의 무결성과 기능적 성능을 손상시킨다고 보고되고 있습니다. 일반적인 소화 프로토콜은 1 mg/mL의 펩신과 10:1의 dECM/펩신 중량비를 사용하여 구조 단백질의 과도한 분해와 생물학적 성능 감소를 초래할 수 있습니다. 본 연구는 표준 소화 프로토콜과 비교하여, 돼지 심막의 dECM 하이드로젤(10 mg/mL)에 대해 펩신 농도(0.75 및 0.5 mg/mL)를 낮췄을 때 구조적, 물리화학적, 기계적 및 생물학적 특성에 미치는 영향을 조사했습니다. 낮은 펩신 농도는 콜라겐의 이차 구조 및 열 안정성을 현저히 개선시켰습니다(317°C ± 4°C에서 324°C ± 1°C로). 0.5 mg/mL의 펩신으로 소화된 하이드로젤은 탄성 계수 119 ± 12 kPa을 나타내며, 이는 표준 dECM(65 ± 6 kPa) 및 Coll-I(41 ± 2 kPa)에 비해 2-3배 높습니다. 저장 계수는 표준 dECM(0.8 ± 0.1 kPa) 및 Coll-I(0.7 ± 0.1 kPa) 하이드로젤의 약 두 배인 1.5 ± 0.1 kPa입니다. 인간 피부 섬유아세포는 이러한 최적화된 하이드로젤에서 향상된 부착 및 두 배 이상의 생존율을 보였습니다. dECM의 고유한 구성상의 장점에도 불구하고 강한 소화에 의해 성능이 저하될 수 있습니다. 우리의 연구 결과는 펩신 농도가 dECM 하이드로젤의 기계적 무결성과 세포 반응을 좌우하는 중요한 조정 가능한 매개변수임을 강조합니다. 이 변수를 최적화함으로써 더 견고하고 생리활성적이며 TERM 응용을 위해 맞춤화된 dECM 하이드로젤을 개발할 수 있습니다.