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제브라피쉬 (Danio rerio) 정자 단기 보존 기술

2026-06-08 07:00
재생산 효율성은 지속 가능한 양식업 및 생물의학 모델 유기체의 유지에 필수적입니다. 제브라피쉬 정자의 단기 저장은 기존 확장제들이 24시간 이내에 사용 가능한 정자 품질을 보존하는 경향이 있어 정규적인 번식 및 정자학 연구에 있어 중요합니다. 본 연구에서는 냉장 저장 결과를 개선하기 위해 정액 혈장의 특성화와 단계별 확장제 스크리닝 및 최적화를 결합했습니다. 제브라피쉬 정액의 평균 삼투압은 251.4 ± 5.2 mOsmol kg⁻¹로 나타났으며, NaCl 주도의 이온 프로파일(Na⁺ 98 mM, Cl⁻ 122 mM), 적당한 K⁺(29.4 mM), 낮은 Ca²⁺(0.66 mM), 그리고 pH 7.85를 보여주어 확장제 제형화에 대한 생리학적 기초를 제공했습니다. 수컷 제브라피쉬는 매우 적은 양의 정액을 생산하므로, 먼저 풀링된 정자를 실험 단위로 검증했습니다. 36시간 보관 기간 동안 5개의 독립적인 풀은 운동성이나 속도 면에서 차이가 없었습니다(P > 0.05). 확장제 스크리닝(E1-E20)에서 NaCl ≥ 120 mM 및 40 mM KCl을 포함한 제형들이 기능 보존에 가장 효과적이었습니다; 36시간 후, E13과 E15는 각각 40.67%와 49.0%의 운동성을 유지했으며, 측정 가능한 속도를 보였으나 대조군은 불활성 상태였습니다. 추가 최적화(E21-E27)에서는 E27 (150 mM NaCl, 40 mM KCl, 2 mM CaCl₂, 1 mM MgSO₄, 20 mM Tris, pH 7.5; 약 385 mOsmol kg⁻¹)이 가장 우수한 것으로 확인되었으며, 36시간 동안 약 52%의 운동성을 유지하고 속도(VCL 및 VSL)를 모든 다른 처리에 비해 유의미하게 높게 유지했습니다(P < 0.0001). 확장제 추가를 2-4시간 지연하면 운동성과 속도에 대한 돌이킬 수 없는 손실을 초래하여, 즉각적인 이온/삼투 안정화가 중요한 것으로 나타났습니다.